Diabetologia：激活但功能受损的记忆Tregs在1型糖尿病患者方面缓慢的过程中逐渐扩展

从第一次注意到胰脏自身抗基底到注意到1改型肝炎检验症状的十分困难率在婴幼儿时期就有很好的阐述，多个胰脏自身抗基底非典型的婴幼儿中都有70%在血清转换成后10年内中风肝炎，而随访15年的婴幼儿这一分之一缩减到84%。远比之下，分之二检验1改型肝炎一半以上的改型1改型肝炎的发病的系统还从未取得充分的科学研究。

越发多的人开始用到仍须系统来定义1改型肝炎的十分困难：性状在注意到多种胰脏自身抗基底时进入第1前期，注意到血糖异常时进入第2前期，注意到症状时进入第3前期。一些多发胰脏自身抗基底非典型的性状，在1期和2期，十分困难较慢，并发展为发病的1改型肝炎。我们之后阐述了一小组在首次监测到多种胰脏自身抗基底核查后将近10年无肝炎的正因如此慢十分困难者，这小组高血压人数少，但特征非常明确。随后，我们辨认出胰脏自身复合物甲基化CD8+T受基底质反应会在十分困难平稳的高血压中都前提不依赖于，但在近期发病和普遍依赖于的肝炎高血压中都很容易监测到。这可能会表明，与十分困难高血压远比，这些高血压自身免疫会的缓冲增强。

早期科学研究表明，尽管缓冲性T受基底质(Treg)比例正常，但肝炎高血压依赖于一些的系统缺点，其中都包括对IL-2的反应会意志力减低。此外，肝炎高血压中都的不稳定性CD4+T受基底质可能会对缓冲不具抵抗性，显出为不稳定性T受基底质的诱发减弱，自然造成了的Treg和人基底内造成了的诱发Treg，以及复合物经历的CD4+T受基底质中都IL-2反应会减弱。本科学研究的目标是阐述了CD4+缓冲性T受基底质(Treg)在海岸边正因如此平稳十分困难者中都的特征，他们的总数为43岁(31-72岁)，随访时间为18-32年。

方法：BOX科学研究是一项以人群为基础的中轴科学研究，在21岁以下肺癌的高血压亲属中都核子对1改型肝炎的危险主因。我们之后阐述了长期平稳十分困难者的特征，他们保持多重胰脏自身抗基底非典型将近10年，但从未注意到肝炎的检验症状，慢性或非受虐自身免疫。随后，10名继续保持无肝炎并希望提供大量肾脏核查的平稳十分困难者纳入T和B受基底质的系统量化。在目前的科学研究中都，8名慢十分困难者(SP小组)，中都位年龄43岁(31-72岁)，18 - 32岁之间的胰脏自身抗基底非典型。所有的行动者都位处1改型肝炎十分困难的1期，尽管一些人随后失去了胰脏自身抗基底对某些复合物的非典型反应会，然而，一名高血压仍然位处2期将近6年，但从未注意到检验症状，一名高血压被检验为肝炎，该受试者72岁，在搜集测试核查时，其HbA1c增高到53 mmol/mol(7%)，在的测试中都对该NADP透过了单独审计。分离外周血单个核子受基底质(PBMCs)，有别于多参数流式受基底质精和T受基底质诱发试验审计NADP中都Treg的频谱、表改型和的系统。用到FlowSOM和CITRUS(聚类比对、表征和回归)透过无监督聚类量化，审计Treg表改型。

结果：与身基底健康NADP远比，来自慢十分困难基底的潜意识CD4+T受基底质的监督聚类表明，激能活的潜意识CD4+ Treg频谱缩减，与糖皮质激素诱发的TNFR相关受基底(GITR)声称缩减有关。一名HbA1c增高的高血压与十分困难平稳者和最简单的对照小组远比，Treg谱不尽相同。的系统量化表明，与身基底健康NADP远比，来自平稳十分困难基底的Treg介导的CD4+不稳定性T受基底质诱发明显受损。显出为对不稳定性CD4+T受基底质CD25和CD134声称的诱发缩减。

三幅1 深入的表改型量化表明，CD4+Treg亚改型在慢十分困难描述符中都缩减。由FlowSOM分解成的Treg室，有数在来自所有NADP的能活CD4+CD45RA -受基底质上。根据上面物声称比对出10个元簇:潜意识T受基底质_1;潜意识T cell_2;潜意识T cell_3;潜意识T cell_4;CD49b潜意识T受基底质;HLA-DR + GITR +潜意识T受基底质;文件系统Treg_1;文件系统Treg_2;文件系统Treg_3;和文件系统Treg_4。(a)用到9个不尽相同Treg上面分解成的10个元簇的MST。每个端口代表一个战斗群(100个战斗群)，相当大的元战斗群(10个元战斗群)在端口小组周围着色。每个端口中都的煎饼三幅声称单个上面的声称行政级别。(b)每个元聚类的热三幅，以表明整基底上面声称。(c, d)为HD小组(c)和SP小组(d)分解成三幅，以及FlowSOM辨别的每个元簇的大块。(e-l)相对重元素为每个metacluster装支线三幅(重元素> 0.05%)确定为HD和SP小组:文件系统Treg_2 (e),文件系统Treg_3 (f),文件系统Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +潜意识T受基底质(h)、潜意识T cell_1(i),潜意识T cell_2 (j),潜意识T cell_3 (k) n d CD49b潜意识T受基底质(l)。绿色左上方代表**SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon选取符号秩核查。此键适用于三幅形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

三幅2 用到CITRUS的预测模改型断定，Treg频谱的缩减是十分困难平稳的图案。分级旁路(a - f)和橄榄量化(g-k)比较SP行动者和最简单的HD行动者在CD4+CD45RA−T受基底质上的差异。(a)子代CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l群基底的传奇色彩三幅。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3富集，然后通过HLA-DR和GITR声称透过分离，模拟FlowSOM群基底。(b) HD(外缘)和SP(白斑)小组以及NADPSP 606(绿色)中都CD25+ cd127的频谱汇总三幅。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+旁路子集的装支线三幅;(c) HLA-DRloGITR−(文件系统Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(文件系统Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(文件系统Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+文件系统T cell)。(g - i)经济作物簇螺旋由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3声称风速着色，箭头突出的簇被辨别为SP和HD描述符之间的不尽相同。(j)装支线三幅表明了在SP(白斑)和HD(灰点)小组中都，CITRUS潜意识Treg_3和Treg_4的相对重元素(分之一)。(k)直方三幅表明每个簇的表改型(蓝色)和Treg上面相对声称与或多或少声称(紫色);上列，文件系统Treg_3;请注意恰巧，文件系统Treg_4。或多或少与所有其他簇中都上面的声称有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon选取符号秩核查

三幅3 与身基底健康献血者远比，十分困难平稳者潜意识treg的GITR缩减。每个潜意识CD4+T受基底质元簇(潜意识T受基底质_1;潜意识T cell_2;潜意识T cell_3;CD49b +潜意识T受基底质;HLA-DR + GITR +潜意识T受基底质;文件系统Treg_2;文件系统Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)监测每个声称上面的变动。(a,b)来自HD (a)和S (b)描述符的声称热三幅(sp606不包括在内)。(c,d)潜意识Treg_4元簇中都所有HD(灰色)、所有SP(紫色)和SP 606(绿色)的FlowSOM GITR声称串联，表明直方三幅(c)和汇总三幅(d)。Wilcoxon选取符号秩和核查，p< 0.07(绿色)所有NADP包括，p< 0.05(紫色)NADPSP 606和最简单的HD不包括在测试中都。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs中都GITR声称，从分级旁路，从所有HD(灰色)、所有SP(紫色)和SP 606(绿色)串联，表明直方三幅(e)和汇总三幅(f) *p< 0.05, Wilcoxon选取符号秩核查

三幅4 来自平稳十分困难的CD4+ treg受基底质控制不稳定性CD4+T受基底质的意志力减低。SP小组用紫色的支线和左上方声称，HD小组用黄色的支线和左上方声称，绿色的支线/左上方声称NADPsp606。用到CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T受基底质透过分选。CD4+CD25−(；也者)被上面为CFSE, Treg按观察的分之一滴定。用抗CD3 /28微珠重置受基底质，培植3当晚透过流式受基底质精监测。(a-d)与CD4+；也者相对应的treg培植(继发性)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD；也者培植。(a,b,f) CFSE细胞分裂(a,e)和CFSE诱发%-(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的诱发%-。用到非典型对照(激能活的响应受基底质不含treg)计算诱发%-。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差量化。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

三幅5 不稳定性CD4+T受基底质对平稳十分困难的T受基底质重置的诱发更敏感。SP小组用紫色的支线和左上方声称，HD小组用黄色的支线和左上方声称，绿色的支线/左上方声称NADPsp606。用到CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T受基底质透过分选。CD4+CD25−(；也者)被cfsel上面，treg按观察的分之一滴定。用抗CD3 /28微珠重置受基底质，培植3当晚透过流式受基底质精(CD25反染)和受基底质因子量化。HD Treg与HD、SP或sp606；也者共同培植。(a,b) CFSE细胞分裂(a)和CFSE诱发次之(b)。(c,d) CD25诱发次之(c)和CD134诱发次之(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在共培植中都的声称。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差量化。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

论据：我们得出的论据是，来自平稳十分困难子的重置潜意识CD4+Treg在GITR声称中都取得了适配和丰富多彩，强调了全面性科学研究Treg在1改型肝炎后果性状中都的异质性的重要性。

译文出处：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28